免疫病理检查检查过程

1. 适应证天疱疮、类天疱疮、红斑狼疮、皮肌炎、皮肤血管炎等免疫性皮肤病. 2. 标本的选择及取材与皮肤组织病理检查基本相同. 3. 标本处理①将需要的皮肤标本用手术或钻孔取下后,立即用OCT复合物包埋剂包埋固定或将标本用湿润的生理盐水纱布包裹,4℃下保存,24小时内用OCT复合物包埋剂包埋.②OCT复合物包埋剂包埋的标本,经速冻后在-22℃～-25℃条件下将组织切成厚度为4～6μm的薄片,置于玻片上. 4. 直接免疫荧光法:将冷冻切片用0.01mol/L、pH7.4的PBS清洗10分钟,晾干后滴加适当稀释的荧光标记的抗人免疫球蛋白抗体,在37~C湿盒中孵育30～60分钟,再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次后晾干,用碳酸甘油缓冲液封片,置于荧光显微镜下观察. 5. 间接免疫荧光法:标本来自正常人皮肤或动物组织(如鼠肝印片);首先将灭活的适当稀释的患者血清滴于标本上,置于37℃湿盒中30～60分钟,再用0.01mol/L、pH7.4的PBS洗涤3次,晾干,后续步骤同直接法. 6. 盐裂皮肤免疫荧光法:取患者的皮损或正常人皮肤标本,置于1mol/L的NaCl溶液中,放在4℃冰箱中用磁力搅拌器低速搅动,每24小时换液一次,经过72小时左右,表皮与真皮分离,OCT包埋进行DIF或IIF检查.

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